Szybki test adenowirusa – wydzielina z nosa

Przeznaczenie:

Zestaw SARS-CoV-2 Nucleic Acid Test służy do jakościowego wykrywania kwasu nukleinowego COVID-19 w wymazach z nosogardła, jamy ustnej i gardła oraz plwocinie. Wyniki testu stanowią podstawę diagnostyki molekularnej dla infekcji lub podejrzenia pacjentów i nie powinny być wykorzystywane jako jedyne kryterium diagnozy klinicznej.

Materiały:

Procedura testowa:

A. Przygotowanie próbki

Wyekstrahowany RNA jest materiałem wyjściowym dla zestawu SARS-CoV-2 Nucleic Acid Test.

Ważne: Każdą procedurę ekstrakcji kwasu nukleinowego należy przeprowadzić jednocześnie z jedną kontrolą dodatnią (40 μl, rozcieńczyć sterylnym roztworem soli fizjologicznej/PBS do pożądanej objętości) i jedną kontrolą ujemną (40 μl, rozcieńczyć sterylnym roztworem soli fizjologicznej/PBS do pożądanej objętości).

Zaleca się stosowanie następujących komercyjnych zestawów do ekstrakcji kwasów nukleinowych: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Zestaw wirusowy RNA Mini (QIAGEN); Zestaw TIANamp Hi-DNA/RNA (TIANGEN);

B. Konfiguracja mieszaniny reakcyjnej

1. Wszystkie odczynniki i próbki należy całkowicie rozmrozić, całkowicie wymieszać i krótko odwirować w temperaturze pokojowej (przybliżony zakres 18 do 25 stopni) przed użyciem.

2. Przygotować wymaganą objętość mieszaniny Reaction Mix w polipropylenowej probówce do mikrowirówki o odpowiedniej wielkości.

3. Odpipetować 25 µl Reaction Mix do każdego wymaganego dołka odpowiedniej optycznej 96-dołkowej płytki reakcyjnej lub odpowiedniej optycznej probówki reakcyjnej.

C. Dodawanie szablonu

1. Dodaj 5 μl wyekstrahowanego RNA z próbek/kontroli pozytywnej/kontroli negatywnej. Całkowita objętość wynosi 30 μl.

2. Dokładnie wymieszaj próbki i kontrole z mieszaniną Reaction Mix przez pipetowanie w górę iw dół/Vortex.

3. Zamknąć 96-dołkową płytkę reakcyjną odpowiednimi pokrywkami lub optyczną folią samoprzylepną, a probówki reakcyjne odpowiednimi pokrywkami.

4. Odwiruj 96-dołkową płytkę reakcyjną w wirówce z rotorem do płytek do mikromiareczkowania przez 30 sekund przy około 2500 obr./min.

D. Programowanie przyrządu Real-Time do PCR

Podstawowe informacje dotyczące konfiguracji i programowania różnych przyrządów do PCR w czasie rzeczywistym można znaleźć w instrukcji obsługi odpowiedniego przyrządu. Test został zoptymalizowany dla systemu ABI7500 Real-Time PCR. Cykl PCR przeprowadza się w warunkach cyklicznych opisanych w poniższej tabeli.

Zdefiniuj detektory fluorescencji

*Proszę ustawić wewnętrzne odniesienie fluorescencji instrumentu na „Brak”, na przykład: W przypadku instrumentów serii ABI ustaw „Passive Reference” na „Brak”.

E. Analiza danych

Proszę ustawić parametry analizy i przeanalizować dane zgodnie z instrukcjami obsługi odpowiednich przyrządów.

Weźmy jako przykład ABI 7500:

Linia bazowa powinna być ustawiona na zakres, który eliminuje fluorescencję tła występującą we wczesnych cyklach amplifikacji, ale który nie nakłada się na obszar, w którym sygnały amplifikacji wznoszą się ponad tło (wartość początkowa: 3~10; wartość końcowa: {{2} }). Próg cyklu (Ct) powinien znajdować się w podstawie fazy wykładniczej. Kliknij „Analiza”, aby automatycznie uzyskać wynik analizy i odczytaj wynik wykrywania w oknie „Raport”.

Popularne Tagi: adenowirus szybki test - nosowy wydzielina, Chiny, dostawcy, producenci, fabryka, Wielka ilość